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HILIC色谱柱可以解决工作中绝大部分项目
点击次数:2970 发布时间:2016-09-27
   HILIC色谱柱为色谱工作者在日常LC方法开发工作中考察不同ACQUITY UPLC色谱柱的分离选择性而设计。我们设计ACQUITY UPLC HSS C18 色谱柱用于在低pH流动相条件下分离碱性化合物和非碱性化合物组成的混合物,同现代高C18覆盖率和完全端基封尾的C18柱相比,这款色谱柱能够提供完全不同的分离选择性。对柱子长短的选择:由于分辨率与柱长的平方根成正比。柱子长,则提高分辨率。一般来说:15m的短柱用于快速分离较简单的样品,也适于快速成分扫描分析;30m的HILIC色谱柱是zui常用的柱长,大多数分析在此长度的柱子上完成;50m、60m或更长的气相HILIC色谱柱/气象色谱柱用于分离比较复杂的样品。
  一般,初次使用气相色谱仪的朋友对色谱柱不知怎样合理配置气相色谱柱/气象HILIC色谱柱,总希望气相色谱柱/气象色谱柱越多越好,盲目购置许多柱子或固定液、担体等,结果有许多闲置造成浪费。专家就此向大家推荐一些值得考虑的经验。
  HILIC色谱柱从多年的经验来谈起,一般准备几个柱子就基本可以解决各类气相色谱分析工作的要求,可优先选择固定液分别为SE-30(或者OV-101)、OV-17、PEG-20M、DEGS、FFAP的柱子各一个。HILIC色谱柱对于填充柱,担体可选白色担体、红色担体(包括未酸洗、酸洗、硅烷化)、GDX系列(或者Porapak系列)三种,基本可以解决工作中绝大部分项目。
  对于口径的选择:HILIC色谱柱柱径直接影响柱子的效率、保留特性和样品容量。小口径柱比大口径柱有更高柱效,但柱容量更小。
  0.25mm:具有较高的柱效,柱容量较低。分离复杂样品较好。
  0.32mm:柱效稍低于0.25mm的HILIC色谱柱,但柱容量约高60%。
  0.53mm:具有类似于填充柱的柱容量,可用于分流进样,也可用于不分流进样,当柱容量是主要考虑因素时(如痕量分析),选择大口径毛细管柱较为合适。专家认为,对于普通用户,可选30米或50米长的毛细管,口径选0.32mm较为便利。
  我们是如何设计HILIC色谱柱达到这样的效果呢?专门研究色谱填料的科学家们在HSS硅胶基体上采用三键键合技术,键合了中等配体密度(约1.6 μmol/m2)的C18配体,而且没有对游离硅羟基进行端基封尾。一般来说,同现代的高C18覆盖率完全端基封尾的C18HILIC色谱柱相比,较高活性的硅羟基将增强碱性化合物的保留,而中等C18配体密度能够对非碱性化合物产生较弱(或相当)的保留。从色谱理论分析,HILIC色谱柱这种独特的键合和端基封尾组合将成为复杂UPLC分离方法开发工作中一个实用且方便的工具。
021-62176111
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