GPC色谱柱用于分离水溶性聚合物,例如,低聚糖、多糖以及阳离子、阴离子、中性聚合物等。这种高分辨率的GPC色谱柱具有如下的优点:pH范围宽(1-12)、允许高有机溶剂含量的流动相(流动相中有机溶剂含量可以达到20%)、适用的流动相范围广。
利用GPC色谱柱对结构异构体进行分离:
GPC色谱柱长期以来被认为是很难对分子量相近的化合物或结构异构体进行分离的。但是通过循环的方法可以轻松的利用GPC色谱柱对以上涉及到的化合物进行分离。
由于H系列色谱柱一般使用氯仿作为流动相,因此对于疏水性样品溶解性比较好。同时在利用循环分离过程中,溶剂的消耗量只有逆相色谱的二十分之一左右。
对于结构异构体进行分离,我们一般需要10到20个循环。而8、9产物由于在硅胶体系中展开非常困难,是以往很难进行分离的产物。
这类产物,即便是在GC上也很难利用SE-30进行分离。但是使用GPC色谱柱,单次上量300mg,只需要10次循环就能够*分离开了。
GPC色谱柱再生:
反方向冲洗色谱柱,冲洗期间不要连接到检测器,采用二分之一的推荐流速进行冲洗(让压力保持在推荐zui大值以下)。
大多数GPC色谱柱填料是PS-DVB,选择一种可以溶解色谱柱中污染物的溶剂。冲洗之前需要检查溶剂兼容性。对于粘度较大的溶剂,必须采用较低的流速,观察压力变化不要超过色谱柱上限。
在某些情况下,根据污染物情况,清洗的时候可以加入能与有机溶剂相溶的酸性物(甲酸或乙酸)或碱性物(三羟乙基胺)(检查pH范围)。
如果更多的疏水性污染物被保留,推荐提高温度并使用适当的有机溶剂。您需要再一次核对色谱柱允许的zui大温度范围。
如果仔细地进行清洗,GPC色谱柱不会因为溶剂转换而导致性能下降。详细操作参考说明书。