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HILIC色谱柱活动相的配制
点击次数:1420 发布时间:2018-08-28
  HILIC色谱柱分别说明:HPLC(液相色谱)是实验室重要的 “分离”手段,而色谱柱则堪称分离的心脏。日常使用HPLC不免会遇到由色谱柱引起的各种故障,因此提前做好维护保养色谱柱的工作十分重要。
  在HILIC色谱柱上,物质的洗脱顺序与反相色谱恰恰相反,在反相柱上很难保留或根本不保留的物质,在通常的实验条件下,它们在HILIC柱上有较强的保留。HILIC使用的梯度和反相模式也是相反的,初始条件为高比例有机相,典型的有机相是95%乙腈,逐步降低到水相(水相比例小于40%)。
  HILIC色谱柱键合技术通过高键合致密度和被调整的均匀度提供了极高的表面覆盖率。均一性越好,硅胶基质周围形成的“疏水保护层”惰性就更强。如此得到了pH稳定性高、重现性好的硅醇基完全失活的键合相。HILIC色谱柱用的超亲水性的填料。和对未修饰的硅胶进行填充的硅胶色谱柱相比,PC HILIC的亲水性更强,对极性化合物如核算碱基的保留更大。
  1. 对极性化合物的保留强。
  2. 高的理论塔板数。
  3. 碱性化合物峰形对称且尖锐。
  4. 适合LC-MS分析。
  HILIC色谱柱活动相的配制:
  液相色谱是样品组分在柱填料与活动相之间质量交换而达到分离的目的,因此要求活动相具备以下的特点:
  a、活动相对样品具有一定的溶解能力,保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保存在柱中)。
  b、活动相具有一定惰性,与样品不产生化学反应(特殊情况除外)。
  c、活动相的黏度要尽量小,以便在使用较长的分析柱时能得到好的分离效果;同时降低柱压降,延长液体泵的使用寿命(可运用进步温度的方法降低活动相的黏度)。
  HILIC色谱柱是强极性化合物分离的有力工具。HILIC色谱柱用于低聚糖的分析,显示出比氨基柱更好的稳定性,更好的分离效果,尤其在使用ELSD检测器的时候,具有更低的背景噪音,显示,HILIC色谱柱可以将葡萄糖在水溶液中存在的两个端基异构体(即α-D-葡萄糖和β-D-葡萄糖)区分开。HILIC色谱柱可以强化对于质谱检测器的响应,通过离子交换,和氢键作用来增加保留。可以提供常规分析,快速分离和1.7um的适用于HILIC超高压分离柱。
021-62176111
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