凝胶色谱柱是以刚性的球型硅胶为基质,在其表面通过共价键化学键合亲水基团而成。凝胶色谱柱的填料具有高性能尺寸排阻色谱所必需的性能,即低吸附性和良好的孔径分布;其pH适用范围为2.5-7.5,可以使用与水*互溶的有机溶剂,如乙腈、丙酮、甲醇或乙醇等。凝胶色谱柱适合用于分析分离蛋白质和多肽类样品。
凝胶色谱柱其充填介质化学稳定性好,不易发生由于官能基脱落而导致样品组分洗脱位置变化的现象。尽管如此,由于柱子的反复使用,在长时间使用后,样品组分的洗脱情况还是会发生改变的。其原因与样品中极微量的附吸物在柱中的蓄积有关。特别由于生物样品组分复杂,这种吸附现象时有发生。(非特异性吸附)当观察到这样的现象后,应使用合适的溶剂将蓄积的吸附物质去除,以恢复柱子的性能。
浅析
凝胶色谱柱的储存方法:
1.将凝胶柱用蒸馏水冲净后充上0.02%-0.05%的叠氮钠水溶液封存,或三氯丁醇(0.015%) 苯基汞代盐(0.001-0.01%)将色谱柱封闭后低温保存(温度在5℃左右)在冰箱。
2.再次使用时,用蒸馏水将保护溶液冲洗掉即可使用。
3.如果第二天还要使用也要从系统中取下,将柱封闭后存于4~8度的冰箱中冷藏。
凝胶色谱柱特点:
1. 凝胶色谱柱具有强大的适用性和可靠性,其主要产品有SW、PW等系列;
2. SL 及PL相对SW和PW而言,具有更好的峰分辨率;而SW和PW柱具有较大样品的承载能力;
3. 凝胶色谱柱适合于分析单分散性的生物大分子,如蛋白、肽等;
凝胶色谱柱更加适合于如多糖和合成聚合物等多分散性的分析分离。
凝胶色谱柱的填料是亲水而刚性,多孔球型,化学和机械性能都非常优异的聚合物。适用于以凝胶色谱的模式分析分离蛋白质、多肽、多糖、寡糖、DNA、RNA、水溶性的有机聚合物和其他水溶性大分子样品等。