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氨基柱的“小秘密”尽情展现
点击次数:457 发布时间:2019-09-19
   氨基柱的“小秘密”尽情展现
  氨基柱既可以正相使用,也可以反相使用,但是要注意的是:正相溶剂和反相溶剂往往是不互溶的,正常情况新氨基柱保存在正相环境中,如氨基柱保存在正己烷-乙腈(99:1)中,而我们做糖分析是用反相流动相,所以要先用异丙醇过渡。
  与氨基柱息息相关的一些名词:
  1.保存液
  种类多样:乙醇,异辛烷:乙醇:水=85:14.7:0.3,新色谱柱如果使用反相流动相条件,请充分置换色谱柱内正相溶剂。
  2.活化
  新色谱柱如果使用HILIC模式,使用前请使用异丙醇小流速过夜平衡色谱柱。流速建议0.1mL/min,之后再转换到100%乙腈冲洗20柱体积,然后转换到和流动相相同比例的不含盐的乙腈水体系冲洗20柱体积。
  3.冲洗
  用乙腈:水=60:40条件对色谱柱进行清洗,清洗时,不建议水相比例超过40%,过高使用水相容易导致键合相水解。
  4.再生
  当色谱柱经过长时间使用,柱效很低时,可以对色谱柱再生处理,用乙腈:水(水中加入0.05%氨水)=60:40条件冲洗30柱体积。
  5.保存
  一个月以内的保存,请使用与所选用流动相组成相同的有机溶剂和水的混合溶液(不含酸、无机盐)进行置换,请避免只用水进行置换;一个月以上的长期保存,在进行了上述处理之后,请用乙腈置换并保存。
  氨基柱糖类分析:
  1.请设定乙腈/水的流动相条件。乙腈的浓度越高,则对糖的保留能力越强。
  2.若采用含甲醇或缓冲盐的流动相,峰会展宽。
  3.若将糖的水溶液作为样品注入,谱峰会展宽。请使用含乙腈50%以上的溶剂来配制糖类样品。
  4.曾在酸性条件下使用过的色谱柱,糖类分析的保留时间、峰形会发生变化。
021-62176111
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