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氨基柱再生的三种方案简介

发表时间:2019-11-19      点击次数:3476
   氨基柱再生的三种方案简介
  氨基柱可正相使用,也可反相使用,但要注意:正相溶剂和反相溶剂往往是不互溶的,正常情况新氨基柱保存在正相环境中。而我们做糖分析是用反相流动相,所以要先用异丙醇过渡。
  氨基柱的键合官能团氨丙基要比C18,C8柱的键合官能团C18,C8容易水解,所以首先要做好其使用寿命稍逊的心理准备,特别是当你的使用条件是反相条件下时。反相条件使用时,要特别注意控制PH值范围,PH值越低越有发生水解的危险,流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。所以,在使用后以及准备长时间放置时,必要的清洗和将氨基柱保存于纯的有机溶剂中是必需的。
  有关氨基柱的再生我们简单理解三种方案:
  ·方案1
  依次用甲醇、异丙醇、CHCl3、正己烷、CHCl3、异丙醇、甲醇冲柱子(各以0.5ml/min的流速,20倍柱体积),再换流动相。这些清洗方法,主要是针对当样品中有杂质逐步吸附累积到填料上时的处理方法,色谱柱表现行为为诸如柱压增高柱效降低等。
  ·方案2
  NH2柱用于反相条件时,NH2键会水解,尤其是在该柱子pH范围以外,在酸性和碱性条件下柱寿命会下降很快,如果在这个条件下使用需要清洗一下,需要用10倍柱体积溶液冲洗,如下:
  95%水/5%乙腈;
  THF;
  95%乙腈/5%水;
 保持95%乙腈/5%水继续冲洗,以低流速0.2-0.5mL/min过夜冲洗。
  ·方案3
  氨基柱使用一定时间后,柱效下降,老化,也可清洗一下柱子恢复柱性能,清洗时依次用10倍柱体积的下列溶液冲洗:
  95%水/5%乙腈;
  THF;
  95%乙腈/5%水;
  再走流动相即可。

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