技术文章

article

当前位置:首页  >  技术文章  >  HILIC模式分析食品中的功能性糖类

HILIC模式分析食品中的功能性糖类

发表时间:2022-06-21      点击次数:93
前言
图片


近年来,食品中的功能性糖类的作用受到广泛关注,分析的需求也越来越大。本文使用的Shodex HILICpak VG-50系列是一款适用于糖类和亲水性化合物分析的聚合物基质氨基柱。填料使用键合了氨基的聚乙烯醇,下图是填料的示意图。

图片

此色谱柱可以抑制还原糖和填料形成席夫碱吸附,得到良好的回收率。另外,不易有硅胶色谱柱的填料溶出问题,不易造成背景上升及MS中的离子化阻碍。可以在碱性条件下使用。(pH使用范围2-13)

本文使用HILICpak VG-50构建了食品中功能性糖类的分析条件。另外,结合实际样品的前处理方法进行了讨论,得到了对糖类分析的有用的结果,下面介绍应用实例。


实验方法和结果
图片
#

乳果糖的分析
图片

乳果糖是乳制品中含有的调节肠内环境的功能性糖类。因为不会被消化、吸收,直达肠道,所以可以成为双歧杆菌的营养液,增加双歧杆菌的繁殖。乳果糖、乳糖、半乳糖的结构相似,在高效液相色谱中分离非常困难。

在HILIC模式中,通常使用乙腈和水的缓冲溶液作为流动相。最初,使用乙腈和水的混合溶液作为流动相,对上述三种二糖类的分离进行了研究。虽然调整了乙腈和水的比例,但无法完全分离出这些二糖类。而且,当乙腈的比例增加时,保留时间变长,基线噪声变大,S/N下降(下图)

图片

因此,我们在流动相中添加了VG-50系列可以使用的甲醇,将水、乙腈、甲醇的混合溶液作为流动相,对分析条件进行了探讨(下图)。通过流动相中添加了甲醇,分离特性发生了变化,成功分离除了结构相似的二糖类。另外,检量线的线性良好,定量性也高。

图片

然后,对市售的乳制品饮料(成分中有乳果糖含量的记载)进行了测定。为了除蛋白,首先称重1mL饮料,添加等量的乙腈,离心分离(890×g,10min),取上清液过0.45μm膜过滤器,作为试验溶液。分析结果显示,A、B两种含乳饮料均含有乳果糖,进一步证实了可以与其他糖类分离(下图)。以上表明VG-50 4E适用于饮料中的乳果糖分析。

图片

分析条件同上。

图片
2.稀少糖的分析

图片

稀少糖作为能使餐后血糖值上升缓慢、抑制内脏脂肪堆积的功能性糖类,被广泛应用于食品中。

此外,由于其还有各种生物活性,被添加到医药品、功能性食品、化妆品中。本文对国际稀少糖学会定义的6种稀少糖的分离进行了探讨。

最初,使用乙腈和水的混合溶液作为流动相,对6种稀少糖的分离进行了确认(下图)。6种稀少糖不能实现完全分离,如果提升乙腈的比例,则S/N值会下降,所以放弃了使用乙腈和水作为流动相的方案。

图片

因此,和分析乳果糖一样,使用水、乙腈、甲醇的混合溶液作为流动相,对分离条件进行了研究。通过添加甲醇的方法成功分离了6种稀少糖。如下图所示,检量线的线性良好,定量性也很高。

图片

接着,我们测定了市售的含有稀少糖的糖浆。首先取0.1g稀少糖糖浆,加入2.5mL超纯水搅拌溶解。确认完全溶解后,加入2.5mL乙腈搅拌,然后过0.45μm的滤膜,作为试验溶液。可以检测出D-Psicose和D-Allose,进一步证实可以与其他糖分离(下图)。另外,虽然在L-Glucose的位置出峰了,本条件下D-Glucose也是相同位置出峰,L体和D体的峰会重合。

图片

图片
乙基 α-D-葡萄糖苷的分析

乙基α-D-葡萄糖苷是清酒中特有的美味成分。近年来,因发现该成分具有保湿效果而备受关注。在此,我们对清酒中所含有的糖类和乙基α-D-葡萄糖苷的同时分析条件进行了研究。标准样品使用糖类和乙基α-D-葡萄糖苷的混合标准液。将水和乙腈的混合溶液作为流动相进行了分离研究(下图)。乙腈比例80%时得到了良好的分离效果,检量线线性良好,定量性也很高。

图片

接着分析了市售的清酒。量取1mL清酒,加入等量的乙腈搅拌均匀,过0.45μm滤膜,作为试验溶液。分析结果显示,清酒A、清酒B主要含有乙基α-D-葡萄糖苷和葡萄糖(下图)。乙基α-D-葡萄糖苷后的成分不明,通过LC/MS检测应该是分子量为138和252的两种成分。

图片

*分析条件同上

图片
结论
图片

使用Shodex HILICpak VG-50 4E色谱柱,可以在HILIC模式下分析食品中的各种功能性糖类。在HILIC模式中一般使用水/乙腈混合溶液作为流动相,但可以通过往流动相中添加甲醇的方法改善分离。另外,还确认了分析实际样品中所含的功能性糖类的可行性,此色谱柱非常适合应用于食品领域。




地址:上海市静安区石门一路211号旺旺大厦18F

邮箱:support@shodexchina.com

传真:021-62179879

  • 手机查看

  • 微信公众号

版权所有Copyright © 2022 昭和电工科学仪器(上海)有限公司 All Right Reserved    备案号:     sitemap.xml     技术支持:化工仪器网     管理登陆