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色谱分析时标样、样品的色谱柱峰随时间加宽的原因
点击次数:2681 发布时间:2015-06-05
 色谱柱分析运行时,有时候会发现标样和样品的色谱峰会随时间加宽,这是由什么原因引起的呢?

 

一般来说,如果保留时间没有太大区别,只是加宽的峰拖尾,可能表明有活化点。如果加宽的峰是对称的,可能是由于正常的色谱柱“损伤和流失”。如果峰前伸,说明色谱柱过载。

 

这一问题需要从色谱的塔板理论进行解释。塔板理论是色谱学的基础理论, 塔板理论将色谱柱看作一个分馏塔,待分离组分在分馏塔的塔板间移动,在没一个塔板内组分分子在固定相和流动相之间形成平衡,随着流动相的流动,组分分子不断从一个塔板移动到下一个塔板,并不断形成新的平衡,一个色谱柱的塔板数越多,则其分离效果越好。

 

塔板理论把色谱柱看作分馏塔,把组分在色谱柱内的分离过程看成在分馏塔中分流的过程,即组分在塔板间隔内的分配平衡过程。塔板理论的基本假设为:

 

1色谱柱内存在许多塔板,组分在塔板间隔内完全服从分配定律,并很快达到分配平衡;

 

2样品加载第0号塔板上,样品沿色谱柱轴方向的扩散可以忽略;

 

3流动相在色谱柱内间歇式流动,每次进入一个塔板体积;

 

4在所有塔板上分配系数相等,与组分的量无关。

  

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