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带你了解SEC尺寸排阻色谱柱的基础知识

发表时间:2018-07-02      点击次数:3532
  SEC尺寸排阻色谱柱以凝胶为固定相。它类似于分子筛的作用,但凝胶的孔径比分子筛要大得多,一般为数纳米到数百纳米。溶质在两相之间不是靠其相互作用力的不同来进行分离,而是按分子大小进行分离。分离只与凝胶的孔径分布和溶质的流动力学体积或分子大小有关。样品进入色谱柱后,随流动相在凝胶外部间隙以及孔穴旁流过。
  SEC尺寸排阻色谱柱包括分子量测定范围不同的5种规格的色谱柱,可以将适合样品分子量和分子量分布的不同级别的色谱柱串联起来进行分析。
  SEC尺寸排阻色谱柱优点:
  1)亲水性甲基丙烯酸酯颗粒。
  2)Pl及Pl-CP柱的粒度为7~13?m,PW柱的粒度为12~17?m。
  3)粒度较小的Pl型树脂具有更高的交联度。
  4)pH值稳定在2~12以内。
  5)淋洗液:水或缓冲剂(zui高可达20%甲醇/80%水)。
  6)现有G6000PW PEEK材质柱,可实现病毒分析过程中的超低样品吸附作用。
  7)温度可达80℃(TSKgel G-DNA-PW的温度为50℃)。
  SEC尺寸排阻色谱柱通过优化填料的粒径和细孔容积,实现了色谱柱性能的提升,和色谱柱操作压强的降低。特别是对单克隆抗体三聚体/二聚体/单体的分离性能有很大的提高,对单体/片段也有很好的分离效果。SEC尺寸排阻色谱柱是专为分离分析单克隆抗体而设计的色谱柱。尽管单克隆抗体也可以通过不同的HPLC模式来进行分析,但SEC尺寸排阻色谱柱适合用来分离mAb多聚体、二聚体以及抗体片段,同时也是研究抗体异质性的好方法。

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