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影响亲水性色谱柱保留行为的有多种参数
点击次数:1184 发布时间:2018-08-02
  亲水性色谱柱是专为亲水性和极性化合物具有更强的保留能力和选择性而设计的。典型的应用是对生物分子、代谢物和药物降解产物如有机酸、水溶性维生素、低聚糖、氨基酸以及小分子缩氨酸和小分子核苷等进行分离。亲水性色谱柱相呈现稳定的基线、高选择性和长保留时间,中性pH值条件下和没有缓冲溶液或反离子添加剂条件下使用,因而这些缓冲溶液和反离子添加剂可以使它们特别适用于LC/MC仪。
  亲水性色谱柱的改性和涂渍技术一个高性能的亲水性色谱柱应该是选择性好、柱效高、液膜均匀、表面惰性,它不仅能分离好所要分析的样品,而且能长期稳定,对样品不吸附、不反应。为了改善固定液对原料管内表面的润湿性,多年的经验表明必需对其改性。毛细管内壁改性主要有两种方法,一种是化学改性,另一种是物理改性。化学改性主要是通过沥滤、淋洗、脱水改性去活的办法,物理改性又叫内壁粗糙化,这个方法在涂渍及制备中等极性和极性固定液柱子时用得较多。
  亲水性色谱柱特点:
  1. 适合亲水性化合物的分离;
  2. 流动相可以使用100%的水溶液;
  3. 具有与优常规的ODS色谱柱不同的选择性。
  亲水性色谱柱因中间是空心的,对载气是无阻的,又命名为空心柱。现在常用的色谱柱内径为250~530μm左右,长度为10~50m左右,使用的长的可达100m,材质主要有金属、玻璃、石英。目前亲水性色谱柱一根内径250μm,长度为20m的壁涂层柱约有100000理论塔板数,比长为5~10m的填充柱的柱效要高得多。美国色谱专家斯科特曾采用低固定液含量、均匀细颗粒填充的长柱子,研制成填充柱,柱效达30000理论板数,用于解决复杂的成分分析,但随着亲水性色谱柱的出现和不断发展,填充柱几乎完全被色谱柱所代替。
  影响亲水性色谱柱保留行为的有多种参数,除了固定相的化学性质外,亲水性色谱柱中其他实验参数(如有机溶剂、流动相pH、盐浓度及柱温)对极性化合物的保留及选择性有很大影响。由于亲水性色谱柱分离中极性化合物在一些流动相pH下带电荷,所以静电作用在亲水性色谱柱中对保留起着重要作用,静电作用可以通过流动相pH及盐浓度调节。有作者通过测定不同性质化合物(包括酸性、碱性及中性)在不同亲水性色谱柱上的保留数据,以确定哪个实验参数是影响亲水性色谱柱分离中选择性的重要因素。
021-62176111
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