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反相柱该怎么切换正相色谱呢?

发表时间:2019-08-13      点击次数:3035
   反相柱该怎么切换正相色谱呢?
  反相柱固定相稳定,应用广泛,可使用多种溶剂。但硅胶为基质的填料,使用时一定要注意流动相的PH范围。一般的C18柱PH值范围都在2-8,流动相的PH值小于2时,会导致键合相的水解;当PH值大于7时硅胶易溶解;经常使用缓冲液固定相要降解。一旦发生上述情况,色谱柱入口处会塌陷。同样填料各种不同牌号的色谱柱不尽相同。如果流动相PH较高或经常使用缓冲液时,建议选择PH范围大的柱子。
 

反相柱

反相柱

  反相柱切换正相色谱的主要流程:
  1.先将色谱柱用相应的溶剂冲洗干净,然后将色谱柱拆下来密封保存。用双通将进样器与检测器连接。
  2.将贮液瓶内装入300ml的二次蒸馏水,将流速渐次提高到2.0ml/min冲洗系统1.5h,注意观察泵压。
  3.将流速渐次降到0ml/min,把二次蒸馏水更换为甲醇,将流速渐次提高到2.0ml/min冲洗系统1h。
  4.用同样的方法将甲醇更换为异丙醇、THF,各冲系统1h。
  5.后将THF更换为预先配制好的流动相冲系统1h,同时将柱塞杆清洗系统内的10%异丙醇更换为流动相,保持50-60滴/min的速度清洗柱塞杆。再将双通更换为正相色谱柱,待色谱柱平衡好以后就可分析样品了。

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