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反相柱的启用知识“大揭秘”!

发表时间:2020-08-18      点击次数:1270
   反相柱采用单相键合、双相键合及三相键合等,单相键合提高传质速率,加快色谱柱平衡;双相相键合增加色谱柱稳定性,增加色谱柱的载样量。封尾方式为活性硅羟基与碱性基团会发生离子交换作用,增加了保留,导致峰形拖尾,键合后用短链将裸露的硅羟基键合后封闭起来,对小分子化合物影响较大。
  反相柱的启用要怎么做?下面就来分享一下:
  1.使用新鲜洁净的水与乙腈或甲醇。冲洗系统,确保系统干净,不含任何缓冲盐和污染物。
  2.取用色谱柱时避免磕碰掉落。
  3.将色谱柱入口端连接到系统上,柱出口端先不要连接,色谱柱身上有箭头标明正确流向。
  4.在0.1mL/min流速条件下用纯乙腈或甲醇润洗色谱柱,然后在2分钟内将流速升至0.5mL/min。
  5.当溶剂均匀的从柱出口端流出,停流速,将色谱柱出口端接到系统检测器上(这样可以避免气泡进入检测系统,并且可快速达到基线平衡)。
  6.重启流速,按照4的方法逐渐提高流速,至常规分析时所使用的流速。
  7.参考色谱柱柱效测试报告中的方法,使用该流动相条件平衡色谱柱,通常需要使用5-10倍柱体积的流动相,直至压力与基线稳定。
  8.测试柱效。如果没有柱效测试报告中的分析物,可以向色谱柱厂家寻求支持,使用合适的浓度与进样量。柱效结果略低于柱效测试报告属正常情况。如结果明显偏低、峰形拖尾,提示色谱柱或所使用的液相系统处于非理想状态,需要进行故障排查。

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