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糖柱我们该如何进行平衡呢?
点击次数:38 发布时间:2020-09-14
   为了保证新的糖柱能在分析使用之前得到足够的钙离子的平衡,推荐使用以下程序进行平衡:
  1.将柱子按照通常使用的反方向安装(标签上的箭头指向柱子的入端口);
  2.用至少100ml的0.001M EDTA钙盐溶液在90℃用0.5ml/min流速反冲柱子,500mg/L的钙盐的浓度大约为0.001M;
  3.将柱子反过来(回到通常的流动方向)用分析所用流动相冲柱子,(用与上一上步骤同样的条件)直到基线平稳方可使用。
  注意事项:
  通常推荐压力不超过2000psi,最大流速不超过0.6ml/min(70℃)。
  不要在流动相中使用氯化钙,硝酸钙以及其它强酸的钙盐,这样会腐蚀柱子,破坏填料。
  流动相中有机相的最大含量为5%(V/V),样品中少量的乙腈、乙醇、甲醇和异丙醇不会影响柱子的性能。
  柱子的温度不要超过95℃。通常高温会带来高的分辨率,但在90-95℃之间几乎没有变化,70℃以下对许多糖的异构体的分离不能提供足够的分离度,对于乙醇的定量,柱温应在75℃。
  柱温的快速变化不会对柱子带来什么反作用,如果柱子在60℃以下,那么高的流速为0.2ml/min,由于水在低温时粘度高,因此高的流速会来很高的反压。
  定期反向冲洗色谱柱(每5L流动相之后),这将会有效地延长色谱柱的寿命。
  流速的变化不能超过0.5ml/min,流速变化应该缓慢进行,建议改变流速时以0.1ml/min为增量,直到反压稳定后再继续增加流速。任何的流速变化均要在不超过0.5ml/min下进行。
  在溶剂输出系统中压力限制的设定应比普通的工作压力高出几百psi,从而避免任何仪器未被注意的额外压力升高。
  如果分析的是不易于转换的糖,那么就没有必要在流动相中使用EDTA_Ca,纯水需要过滤和脱气,如果要保持柱子适宜的性能,柱子的再生和流路的方向变化要经常进行。
021-62176111
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