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氨基柱在正反相条件下的使用

发表时间:2017-01-06      点击次数:7172
   氨基柱是指以硅胶作为基质载体,键合氨基的色谱柱。氨基柱通常用于分析糖类化合物,所用流动相通常是甲醇、乙腈和缓冲盐溶液,乙腈相对使用较多。
  氨基柱的清洗:
  简单说起来,正相条件下使用的氨基柱你就参照硅胶柱的清洗方法;反相条件下使用的氨基柱你就参照C18的清洗方法。
  平时氨基柱在正相条件下使用:
  首先用50倍柱体积的异丙醇清洗,因异丙醇粘度较大可适当放低流速;之后,用50 倍的甲醇清洗;之后,用异丙醇过渡回到平常使用的正相流动相,即可。
  平时氨基柱在反相条件下使用:
  缓冲盐应及时冲洗,以及不能直接用纯甲醇冲洗缓冲盐等,属常识就不作特别交待了。用50倍纯甲醇冲洗;之后,用异丙醇过渡后,用二氯甲烷冲洗色谱柱;之后,再用异丙醇过渡回来到甲醇条件下。
  氨基柱是同时可以用于正相和反相条件的一种色谱柱。但正相溶剂和反相溶剂是不互溶的,这一点不能忽略。对于新购柱子,首先请注意打开分析测试说明书,了解柱子的保存溶剂。如果保存溶剂与你将要使用的流动相极性不同不会互溶,请先用异丙醇过渡。过渡过程中注意因异丙醇粘度较大,会导致柱压很高,适当调低流速。如果流动相中还有缓冲盐类,先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡,避免缓冲盐的析出。

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