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凝胶色谱柱充填介质化学稳定性好

发表时间:2017-02-09      点击次数:7288
   凝胶色谱柱主要进行大分子样品分子量与分子量分布的检测,如果样品分子量差异较大,应该也可以进行分离。这类样品可以作为宽标的标准样品进行标准曲线的建立。  另外,凝胶色谱柱检测的样品有油性的高分子物质,如树脂类等,还有水溶性的高分子物质如糖类等。
  凝胶色谱柱在使用过程中主要应该注意的是:
  1、每根色谱柱都有一定的压力范围(说明书有说明),一般要在合适的压力下进行分析使用。
  2、凝胶色谱柱在制作过程中是在一定的压力下按一定的方向添装 的,因此要求在使用时要按照规定的方向进行连接。如果不小心装反了也不用着急,一般没有超压使用应该影响不是很大。但如果一直使用了很长时间如半年或1-2年,建议你就一直这样使用下去。
  3、分析样品和流动相一定要过滤干净,不要让对柱有害的物质通过色谱柱。
  4、增加一根保护柱或柱前保护对分析柱是有好处的。
  5、凝胶色谱柱能不能反冲,在第2中提到了一点,一般咨询厂家时都会告诉你不能反冲,主要是担心反冲会使柱中的填料松散,那样整根柱子就报废了。这一点应该很好理解,就是在一定压力一定方向将填料填充压紧,如果反向冲操作不当很容易就会使原来压紧的填料松散开,这是无法弥补的损坏。但在具体使用中,就我所知可以在压力低一些,也就是流量小一些的条件下进行反冲,只要没有影响到柱内的填料,将堵塞的物质冲出可以有效降低系统压力,改善柱效。
  凝胶色谱柱充填介质化学稳定性好,不易发生由于官能基脱落而导致样品组分洗脱位置变化的现象。尽管如此,由于柱子的反复使用,在长时间使用后,样品组分的洗脱情况还是会发生改变的。其原因与样品中极微量的附吸物在柱中的蓄积有关。特别由于生物样品组分复杂,这种吸附现象时有发生。(非特异性吸附)当观察到这样的现象后,应使用合适的溶剂将蓄积的吸附物质去除,以恢复柱子的性能。

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