HILIC色谱柱的平衡

　　在HILIC工作条件下，固定相表面会建立一个富集水的液体层，待分析物在流动相和该亲水层之间进行分配，从而实现分离，氢键作用和偶极间的相互作用是影响保留强弱的主要因素。另外，固定相和目标化合物之间的静电作用也在分离中起了作用，通过调节流动相中盐或缓冲盐的浓度洗脱目标化合物。

　　 HILIC色谱柱采用了极性改性的固定相，能够在其表面形成一层富水层，从而增强了对一些强极性化合物的保留能力，有效地克服了反相色谱对该类化合物保留能力差的缺点。与传统的反相色谱柱不同，HILIC色谱柱只需要流动相中含少量的水，即可实现对强极性化合物的保留，而有机相的增加有利于提高对化合物的检测灵敏度，特别是对于小内径色谱柱而言。

　　*  独特的选择性，适用于强极性化合物的分离分析

　　*  提高对亲水性、极性化合物的检测灵敏度

　　*  增强了对强极性化合物的保留能力

　　*  快速高通量分析，提高工作效率

　　*  优异的批次重复性

　　*  适合于分离亲水性和极性化合物、氨基酸、多肽、水溶性维生素、药代谢物

　　 HILIC色谱柱的平衡：

　　i. 使用50倍柱体积的50/50的乙腈/水相缓冲溶液（缓冲液的zui终浓度为10mM）平衡新色谱柱

　　ii. 在开始进样前，用20倍柱体积的起始流动相平衡色谱柱

　　iii. 进行梯度分析时，进样间隔需要用10倍柱体积起始流动相平衡色谱柱

　　说明： HILIC色谱柱平衡不充分将导致保留时间漂移