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当前位置:首页 > 技术文章 > OHpak SB-800 HQ、LB-800系列的分离条件
1) 非离子性亲水性样品和离子性亲水性样品盐溶液和缓冲液经常被用来作为流动相。典型的代表有以下几种:盐溶液----氯化钠水溶液、硝酸钠水溶液、硫酸钠水溶液、硫酸钙水溶液、硫酸铵水溶液缓冲液----磷酸缓冲液、三盐酸缓冲液、醋酸缓冲液、柠檬酸缓冲液 添加盐的浓度为0.05~0.3 M。
注意(1) pH值范围请控制在3.0~10.0。(2) 如果流动相中含有氯离子,则流动相的pH请高于6。(3) 可使用的溶剂最大盐浓度为0.5 M。(4) 不推荐使用硼酸缓冲液是因为填料中的基团会和硼酸发生反应。2) 非离子性疏水性样品和离子性疏水性样品为了抑制疏水性样品的疏水性吸附,推荐在流动相中加入有机溶剂。另外,离子性的样品还需添加盐溶液。注意色谱柱中的流动相置换成含有机溶剂的流动相时,流速请控制在0.5 mL/min以下。使用DMSO时,流速必须控制在0.3 mL/min以下并且色谱柱温度必须高于50 ℃。3) 蛋白质样品尿素和6M胍的水溶液可以作为蛋白质的变性剂而用作流动相。膜蛋白质这类的在水中溶解性很小的样品,在溶剂中添加SDS或Brij-35等表面活性剂,效果很好。注意因为需要使用浓度较高的变性剂,如果色谱柱的溶剂频繁更换,可能会缩短色谱柱寿命。所以,推荐使用专用的色谱柱。
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