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OHpak SB-800 HQ、LB-800系列的分离条件

更新时间:2023-09-26      点击次数:336
 SB-800 HQ、LB-800系列的流动相条件


1) 非离子性亲水性样品和离子性亲水性样品
盐溶液和缓冲液经常被用来作为流动相。典型的代表有以下几种:
盐溶液----氯化钠水溶液、硝酸钠水溶液、硫酸钠水溶液、硫酸钙水溶液、硫酸铵水溶液
缓冲液----磷酸缓冲液、三盐酸缓冲液、醋酸缓冲液、柠檬酸缓冲液 添加盐的浓度为0.05~0.3 M。
 


注意
(1) pH值范围请控制在3.0~10.0。
(2) 如果流动相中含有氯离子,则流动相的pH请高于6。
(3) 可使用的溶剂最大盐浓度为0.5 M。
(4) 不推荐使用硼酸缓冲液是因为填料中的基团会和硼酸发生反应。

2) 非离子性疏水性样品和离子性疏水性样品
为了抑制疏水性样品的疏水性吸附,推荐在流动相中加入有机溶剂。另外,离子性的样品还需添加盐溶液。

注意
色谱柱中的流动相置换成含有机溶剂的流动相时,流速请控制在0.5 mL/min以下。
使用DMSO时,流速必须控制在0.3 mL/min以下并且色谱柱温度必须高于50 ℃。

3) 蛋白质样品
尿素和6M胍的水溶液可以作为蛋白质的变性剂而用作流动相。膜蛋白质这类的在水中溶解性很小的样品,在溶剂中添加SDS或Brij-35等表面活性剂,效果很好。

注意
因为需要使用浓度较高的变性剂,如果色谱柱的溶剂频繁更换,可能会缩短色谱柱寿命。所以,推荐使用专用的色谱柱。

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