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饮料中的难消化性糊精的分析 (LB-802.5)

更新时间:2024-01-02      点击次数:353

                                膳食纤维可用于预防血脂异常、便秘和肥胖。 难消化性糊精被认为是 1991 年在日本推出的特定保健用食品(Tokuho)中的一种成分。分析含有大量低分子量水溶性膳食纤维(如难消化性糊精)的样品,使用酵素-高效液相色谱法。特定保健用食品标准记载了难消化性糊精的定量方法,即对一系列前处理样品进行 HPLC 分析,并测定膳食纤维部分与甘油(内标物)的峰面积之比。以下是我们对市售的含有难消化性糊精的饮料进行了前处理,并参照 特定保健用食品标准中描述的步骤,使用水溶性SEC用色谱柱OHpak LB-802.5分析的应用实例。 另外,前处理方法与特定保健用食品标准中描述的方法有部分不同。

*根据《食品标签标准》,低分子量水溶性膳食纤维是指色谱图中保留时间早于红色虚线位置(麦芽三糖的洗脱位置)的纤维。


前处理方法

  1. 1.将 5 mL饮料样品溶解在45 mL 0.08 M 磷酸盐缓冲液(pH 值 6.0)中。

  2. 2.加入 0.2 mL α-淀粉酶,确认 pH 为6.0 ± 0.5。 *该样品的 pH 值为 6.3。

  3. 3.放入沸水浴中,在 90 ℃ 下振荡反应 30 分钟。

  4. 4.冷却后,加入 0.2 mL 蛋白酶和淀粉葡萄糖苷酶溶液,确认 pH 为6.0 ± 0.5。 *该样品的 pH 值为 6.3。

  5. 5.在 60 ℃ 下振荡反应 30 分钟。

  6. 6.放入沸水浴中,在 100 ℃ 下加热 10 分钟。

  7. 7.冷却后,加入 3 mL用水稀释 10 倍的甘油。

  8. 8.用水定容至100 mL,制成酶处理溶液。

  9. 9.将 50 mL 酶处理液以 50 mL/h 的速度通过*离子交换树脂。
       *Amberlite™ IRA-67 和 Amberlite™ 200CT(杜邦)各25 mL 混合。

  10. 10.将约 150 mL 水通过第9步的离子交换树脂 (总流出液:200 mL)。

  11. 11.在旋转蒸发仪中浓缩。

  12. 12.加水定容至 20 mL 。

  13. 13.用 0.45 µm 膜过滤器过滤,作为HPLC 样品。

Sample: 20 μL
Pretreated beverage containing indigestible dextrin

  1. 1.Dietary fiber fraction

  2. 2.Glucose

  3. 3.Glycerin (Internal standard)

Chromatogram of indigestible dextrin
  • Column

  • Shodex OHpak LB-G 6B (6.0 mm I.D. x 100 mm) + LB-802.5 (8.0 mm I.D. x 300 mm) x 2

  • Eluent

  • H2O

  • Flow rate

  • 0.5 mL/min

  • Detector

  • RI

  • Column temp.

  • 80 ℃


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