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IEC系列的分离条件

更新时间:2023-09-26      点击次数:548
  常用流动相可以使用下述缓冲溶液或者氯化钠、硫酸钠、硫酸钾等盐溶液。而且也可以在缓冲溶液中添加盐。总盐浓度一般为20 mM ~ 1 M。
 
  乙二醇和2-丙醇等极性有机溶剂,可以上限为20 % (v/v)。
 
  梯度洗脱时请按下述顺序进行色谱柱的平衡。
 
  缓冲液A(低离子强度)通夜10 mL。
 
  缓冲液B(高离子强度)通夜40 mL置换成正确的反离子。
 
  缓冲液A通夜15 mL平衡。
IEC QA-825、DEAE-825作为流动相使用的缓冲溶液,必须和缓冲离子具有相同的正电荷,且在使用的pH条件下有足够的缓冲能力。
pH range Buffer
4.8 - 5.0 N-Methylpiperazin·HCl
5.0 - 6.0 Piperazine·HCl
5.5 - 7.3 Bis-Tris*1·HCl
6.4 - 7.3 Bis-Tris Propane*2·HCl
7.3 - 7.7 Triethanolamine·HCl
7.5 - 8.0 Tris·HCl
8.0 - 8.5 N-Methyldiethanolamine·HCl
8.4 - 8.8 Diethanolamine·HCl
8.5 - 9.0 1,3-Diaminopropane·HCl
9.0 - 9.5 Ethanolamine·HCl
*1 2-bis(2-hydroxyethyl amino-2-(hyroxymethyl)-13-propanediol)
*2 1,3-bis(tris(hydroxymethyl)methylamino)propane
IEC SP-825、CM-825作为缓冲液使用的流动相,必须和缓冲离子拥有相同的正电荷,且在使用时的pH条件下有足够的缓冲能力。
pH range Buffer
3.8 - 4.3 Sodium Formate
4.3 - 4.8 Sodium Succinate
4.8 - 5.2 Sodium Acetate
5.0 - 6.0 Sodium Malonate
5.5 - 7.0 2-(N-morpholino)ethanesulfonic acid (MES)
6.7 - 7.6 Sodium Phosphate
6.8 - 8.2 2-[4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinyl]-ethanesulfonic acid (HEPES)
7.7 - 9.1 N,N-Bis(2-hydroxyethyl) glycine (BICINE)
8.6 - 10.0 2-(cyclohexylamino)ethanesulfonic acid (CHES)

 

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