生物纳米产品分析·纯化用色谱柱

Shodex UB系列是水溶性尺寸排阻色谱柱。适用于病毒、病毒样颗粒(VLP)、外泌体等生物纳米产品的分离。

(标准柱)   [外壳材质 : SUS]

下图为使用生物纳米产品分析纯化用水溶性SEC(GFC)色谱柱UB-100与各种检测器组合，对外泌体(EV)进行了分析。UV(280 nm)用于检测生物源性杂质整体，荧光(FL; Ex 280 nm / Em 348 nm)主要用于检测蛋白质（以Trp残基为指标），MALS散射(LS)特别对纳米粒子类别的大型目标产生高灵敏度的响应。此外，通过MALS可以得到目标的旋转半径(RMS radius)的估计值。
根据MALS的信息，大约13分钟附近是以外泌体(EV)为主要组分的区域，并且从RMS半径的信息可以推测分子大小存在分布。本次分析使用的EV样品虽然是纯化级别的，但从UV、FL的分析结果来看，在EV区域之外也检测到了峰值，可以推测仍含有杂质。
UB-100不仅能够对以外泌体(EV)为主的50 nm以上的纳米产品进行分析纯化，以实现目标的分析，而且还兼顾了产物与生物源性杂质的分离。此外，UB-100考虑到了实验室规模的制备应用，通过采用27 µm的单分散粒子，实现了在分析生物源成分的高负荷工作流程中仍能保持低压。同时，UB-100具备高耐碱性，可以用碱清洗，从而提高再现性和减少拖尾效应。

样品: 15 μL
外泌体(EV)

色谱柱：

Shodex UB-100 (8.0 mm I.D. x 300 mm)

流动相：

PBS (-)               

梯度设置：

0 to 50 % B (0 to 10min), 50 % B (10 to 15 min),

50 to 0 % B (15 to 16 min), 0 % B (16 to 20 min)

流速：

0.6 mL/min

检测器：

UV (280 nm) (small cell volume),

Fluorescence (Ex. 280 nm, Em. 348 nm),

MALS (Multi angle light scattering)

柱温：

室温

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