应用 | 抗体偶联药物的分析

1 抗体药物偶联物的药物抗体偶联比分析 (ODP2 HP-4B)

抗体药物偶联物(Antibody-Drug Conjugate; ADC)是将低分子药物通过化学键与单克隆IgG的半胱氨酸残基及赖氨酸残基相结合，作为同时具备抗体药物和低分子药物优点的新一代药物而备受关注。ADC的药物抗体偶联比(Drug Antibody Ratio; DAR)是品质管理的一项重要指标。以下是使用聚合物基质反相色谱柱ODP2 HP-4B利用疏水色谱模式，按照DAR从小到大的顺序分析市售的半胱氨酸型ADC的应用实例。(图中的DAR后面的数字表示低分子药物的结合数)。

Sample : 5 µL
SigmaMAb ADC Mimic  1 mg/mL
(in H2O)

Column: Shodex ODP2 HP-4B (4.6 mm I.D. x 50 mm)

Eluent: 

(A) 1.5 M (NH4)2SO4 in 50 mM Sodium phosphate buffer (pH7.0)

(B) 50 mM Sodium phosphate buffer (pH7.0)/IPA=75/25

High pressure linear gradient;

(B %) 0 % to 100 % (0 to 20 min), 100 % (20 to 30 min),

100 to 0 % (30 to 30.01 min), 0 % (30.01 to 35 min)

Flow rate: 0.8 mL/min

Detector: UV (280 nm)

Column temp.: 30 ℃

2 抗体药物偶联物的SEC分析

以下是使用水溶性SEC(GFC)色谱柱PROTEIN LW-803分析抗体药物偶联物制剂的应用实例。确认了除单体外的二聚体峰。LW-803适用于抗体药物偶联物凝聚体杂质的分析。
Sample : 20 µL
Antibody-drug conjugate
formulation 5 mg/mL
(in H2O)
1. Dimer
2. Monomer

Column: Shodex PROTEIN LW-803 (8.0 mm I.D. x 300 mm)

Eluent: 50 mM Sodium phosphate buffer (pH7.0) + 0.3 M NaCl/CH3CN=90/10

Flow rate: 1.0 mL/min

Detector: UV (280 nm)

Column temp.: 25 ℃

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